Микрохимические исследования энзимных систем

Для диагностики поражения печени, как и при переходе вирусного гепатита в хроническую форму, очень важно соотношение ГОТ/ ГПТ (коэффициент De Ritis). В нормальных условиях у здоровых людей, как и при хронических формах заболевания, это соотношение превышает единицу, а у больных с вирусным гепатитом и другими паренхиматозными заболеваниями печени оно значительно ниже единицы. К сожалению, определение активности трансаминаз имеет диагностическое значение не только при заболеваниях печени, но и при других заболеваниях. Увеличение ГОТ и ГПТ бывает также при инфаркте миокарда, остром панкреатите и др. Представляют интерес микрохимические исследования энзимных систем, проведенные И. Д, Мансуровой и соавт. посредством одновременного определения обеих трансаминаз в ткани печени, взятой при биопсии, и в сыворотке крови. Самый острый период вирусного гепатита сопровождается подавлением активности ГПТ, самой низкой в разгаре болезни. У больных с острой формой вирусного гепатита автор находит активность ГОТ значительно повышенной Этим объясняется низкий коэффициент De Ritis, Определение активности альдолазы имеет большое значение для доказательства цитолиза гепатоцитов у больных с вирусным гепатитом. Brum впервые доказал, что при этом заболевании значительно изменяется активность альдолазы, катализирующей реакцию расщепления фруктозо-1,6-дифосфата на две молекулы фосфотриоз. Определение активности альдолазы в сыворотке крови является очень ценным диагностическим тестом, так как с его помощью можно диагностировать вирусный гепатит в самой ранней стадии, даже до появления клинических симптомов. Обычно через 2-3 нед после контакта с больными вирусным гепатитом могут устанавливаться повышенные величины альдолазы, что говорит о начале заболевания.

Определение активности трансаминаз

При использовании этой классификации энзимов и большого числа ферментов с клинической точки зрения необходимо производить многочисленные определения. Правильнее было бы выбрать характерные энзимные комплексы, посредством которых можно-определить вид патологического процесса в печени — цитолиз, хо-лестаз, раковое перерождение или дегенерацию. Для вирусного гепатита используется энзимный комплекс для доказательства цитолиза при повреждении паренхиматозных клеток, а именно определение ГОТ и ГПТ, органоспецифических энзимов урокиназы, аргиназы, альдолазы, орнитинкарбамилтрансферазы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и гистидазы. Могут использоваться еще сорбитдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа, холинэстераза, аце-тилхолинэстераза, холиндегидрогеназа. Для доказательства внутри-печеночного холестаза при вирусном гепатите определяется активность ГГТП, ЩФ и лейцинаминопептидазы. Определение активности трансаминаз (ГОТ и ГПТ) в сыворотке. Нормальные величины этих двух энзимов в сыворотке крови колеблются: ГОТ до 20 Е/л, ГПТ до 15 Е/л. У больных с сывороточным гепатитом повышаются обе трансаминазы. При очень тяжелых поражениях (острый некроз печени) их величины в сыворотке крови резко повышены. В самой острой фазе вирусного гепатита ГОТ и ГПТ повышены у 100% больных. Саградян изучил активность трасаминаз (ГОТ и ГПТ) в крови, слюне и моче в остром периоде вирусного гепатита и установил, что-они повышены по меньшей мере в 3 раза по сравнению с нормальными величинами и их активность полностью коррелирует с тяжестью заболевания. Если величины трансаминаз остаются высокими, то это говорит о затяжном течении болезни; если же их величины снижаются, а потом снова повышаются — о новом некрозе печени или рецидиве болезни. Величины ГОТ и ГПТ в сыворотке крови нормализуются очень медленно.

Морфологический синдром цитолиза

Морфологический синдром цитолиза, являющийся необратимой стадией для клетки, характеризуется пузырьковой дистрофией, эозинсфильной дегенерацией и полным некрозом. Пузырьковая дистрофия, кроме большого объема клеток, приводит к увеличению митохондрий, исчезновению зернистой структуры эндоплазматического ретикулума, вакуолизации и скоплению хроматина по краям клетки и, наконец, к ацидофильному некрозу с разрывом и исчезновением клетки. Клетка сморщивается, изолируется от других клеток и в виде ацидофильных телец Каунсильмена выталкивается из печеночных клеток; далее эти тельца фрагментируются и лизируются. Этот процесс также является энзимным. Естественно, что при клеточном аутолизе наблюдается еще ряд процессов повреждения сосудов и желчных капилляров (при вторичной мезенхимальной воспалительной реакции с закупоркой желчных капилляров тромбами), приводящих к экскреторно-билиарному синдрому и др.. До сих пор изучено около 100 различных энзимов, 25 из которых находятся в митохондриях, около — 30 в цитоплазме и остальные — в лизосомах и микросомах. По Richterich, печеночные энзимы подразделяются на 3 группы. 1. Секреционные, которые образуются в самих гепатоцитах, переходят в плазму и принимают участие в некоторых процессах, таких, как свертывание крови. 2. Индикаторные, которые образуются в гепатоцитах и выполняют внутриклеточные функции,- различные дегидрогеназы и трансаминазы. 3. Экскреционные энзимы, частично образующиеся в печени и выделяющиеся с желчью; таковыми являются, например, ЩФ и лейцина-минопептидаза.

Изменения в цитоплазме печени

Под цитолизом, по определению Auzery и соавт., следует понимать совокупность всех изменений гепатоцитов, их клиническое, биохимическое и морфологическое проявление. По мнению Димит-риу и соавт., аутолиз представляет собой сложный комплекс гистологических и гуморальных нарушений в печени, отражающих различную степень повреждения печеночных клеток агрессивными факторами. Изменения в цитоплазме печени больных вирусным гепатитом характеризуются двумя стадиями некробиоза: 1) биохимической, или преморфологической, являющейся обратимой, и 2) морфологической, или необратимой. Самые ранние биохимические проявления цитолиза гепатоцитов связаны с нарушениями окислительного фос-форилирования и снижением концентрации АТФ и НАД. В этой стадии восстанавливается тканевое дыхание (обратимая стадия), если назначаются никотинамид и АТФ. Christie установил понижение активности ферментов цикла Кребса, a Stoner, Magyar, Idach и соавт. электронно-микроскопическими исследованиями установили набухание и увеличение объема митохондрий. При прогрессировании клеточного цитолиза, кроме энзимных систем окислительного фосфорилирования, подавляются системы окислительного дезаминирования и переаминирования. Инактивируют-ся также цитохромоксидаза, глюкозо-6-фосфатаза, рибонуклеаза, де-зоксирибонуклеаза, кислая фосфатаза, катепсин. Из лизосом поступает ряд гидролитических энзимов, еще более нарушающих клеточную структуру. В этом периоде автолиза и некробиоза клетки наблюдается накопление в сыворотке крови большого количества печеночных энзимов (гиперферментия).

Энзимные нарушения при острых паренхиматозных гепатитах

В эту группу печеночных заболеваний включены различные формы вирусного гепатита, инфекционный лимфомононуклеоз, желтая лихорадка, герпетический гепатит; бактериальные поражения печени при бруцеллезе, туберкулезе, сифилисе, лептоспирозе, брюшном тифе, паратифе и др., стрептококковые и пневмококковые поражения печени, а также токсические поражения печени эндогенного и экзогенного происхождения: уремия, токсикоз беременности, отравления мышьяком, оловом, атофаном, тетрахлорметаном, нитробензолом, ДДТ, алкоголем, ядовитыми грибами, змеиным ядом, хлорными и фосфорорганическими пестицидами и др. К этой же группе относятся и. некоторые острые холангиогепатиты, холестаз и сосудистые заболевания типа острого анемического инфаркта. Самым характерным и частым паренхиматозным заболеванием печени является вирусный гепатит. Здесь будут рассмотрены характерные энзимные нарушения на примере этого представителя группы острых паренхиматозных гепатитов. Энзимные нарушения связаны с тонкими изменениями ультраструктуры гепатоцита, затрагивающими ядро, митохондрии, эргастоплазму, лизосомы и саму цитоплазму. И. В. Давыдовский очень хорошо обобщил основные морфологические и последующие биохимические изменения: «Таким образом, с морфологической точки зрения основным процессом в печени является дистрофия и некробиоз; это влечет за собой полный распад протоплазмы печеночных клеток с образованием в ней свободных частиц жира и белка. Наступающий потом аутолиз с всасыванием продуктов распада приводит окончательно к опустошению паренхимы органа. Биохимической основой этих процессов является высвобождение внутриклеточных энзимов, быстро разрушающих белковые и другие вещества». Этот процесс, однако, имеет неспецифический характер и может наблюдаться и при других заболеваниях.

Добрые советы