Чувствительность энзимного исследования зависит от активности энзима в соответствующем органе, от его расположения в клетке, от быстроты распада и выделения из сыворотки и др.. Критерием чувствительности энзимного исследования может быть степень повышения его активности по отношению к средней арифметической нормы или еще удачнее кратности повышения к верхней границе нормы. Некоторые индикаторные энзимы отличаются высокой чувствительностью (например, ЛДГ, ГОТ и др.) и при повреждении многих органов сильно увеличивают свою активность в сыворотке. Однако это повышение не позволяет дать определенное заключение относительно места повреждения, если не использовать другие клинические, энзимные и лабораторные показатели. Увеличение ЛДГ обнаруживается при многочисленных заболеваниях, а ГОТ — при заболеваниях печени, сердца, скелетной мускулатуры и др. Самым ценным является клиническое значение исследований энзимов, с одновременной их высокой чувствительностью и специфичностью. Такое сочетание, однако, достаточно редкое, поэтому на практике подбираются энзимные исследования с высокой чувствительностью, имеющие достаточную относительную специфичность для конкретной диагностической задачи. Для увеличения диагностических возможностей добавляется определение их изоэнзимов или же используется целенаправленная энзимная констелляция, которая позволила бы дать специфическую оценку органной локализации заболевания.

Особенно важное значение при сывороточной энзимной диагностике имеет правильный подбор энзимов, используемых для решения конкретной задачи. В начальном периоде бурного развития сывороточной энзимной диагностики существовала заметная тенденция к использованию большого числа энзимных исследований — энзимных констелляций. Это стремление, однако, не оправдалось на практике, так как большинство энзимов изменяется по одним и тем же механизмам или это имеет значение для некоторых групп энзимов. Нагромождение множества результатов с одинаковым клиническим значением оказалось неоправданным и с точки зрения излишней загрузки клинических лабораторий и увеличения стоимости диагностической работы. В настоящее время эффективное применение сывороточной энзимной диагностики основывается на умелом подборе малого числа энзимных исследований большой диагностической ценности. Энзимные констелляции (комплексы) обычно состоят из;3-6 энзимных определений. Основными качествами энзимных исследований, определяющими их клиническую ценность, являются их диагностическая специфичность и диагностическая чувствительность. Органная специфичность всегда относительна, так как ни один энзим не находится только в одном органе. Однако она связана с высокой активностью энзима в данном органе по отношению к другим, и это дает основание соотнести повреждение данного органа с увеличением энзима в сыворотке. Вместе с тем эти энзимы, как правило, изменяются только при тяжелых повреждениях. Например, увеличение сорбитоЛдегидрогеназы и 1-фосфофруктальдо-лазы является специфичным для заболевания печени, но нормальная активность в сыворотке на дает возможности заключить, что отсутствует повреждение печени.

Не следует считать, что катал имеет ранг «международной единицы» (U), так как они имеют различные дефиниции, независимо от того, что цифровое значение «количества энзима» в «единицах» пропорционально «каталитическому количеству» в каталах при выражении результатов одного и того же метода исследования. В биологических жидкостях человеческого организма активность энзимов чаще показывает их ненормальное, чем нормальное, распределение. Вследствие многочисленности используемых методов границы нормальных значений должны быть получены в контрольной группе здоровых людей теми же методами и при тех же условиях. Для правильной интерпретации результатов важно знать и некоторые физиологические колебания энзимной активности: 1.Половые различия — отсутствуют для большинства энзимов, но у женщин КФ, Р-глюкуронидаза, КФК, ГОТ и ГПТ имеют меньшие величины, верхняя граница нормы для большинства диагностически важных энзимов, однако, одинакова. 2. Возрастные различия — у новорожденных и в раннем детстве многие энзимы имеют большие величины. После 2- 3 лет жизни только АФ имеет значение как показатель более усиленного роста костной системы. В старческом возрасте более высокие значения имеют МДГ, ГОТ и ГПТ. 3. Дневные колебания — величины энзимов не показывают значительных колебаний, изредка отклоняясь до 40% от среднего нормального значения в сторону повышения ночью и понижения к обеду. 4. Мышечная работа — у нетренированных людей продолжительная физическая работа приводит к выраженному колебанию ГОТ, ГПТ, ЛДГ, АЛД, МДГ, ПК и особенно КФК. 5. Беременность — большинство энзимов не изменяет активности при нормальной беременности. Противоречивы данные о небольшом увеличении ГОТ, КФК и ЛДГ в последние недели беременности. АФ, ЛАП, окститоциназа, глюкуронидаза и гистаминаза изменяют свою активность в несколько раз при наступлении беременности и через несколько дней после родов снова приходят к норме.

Техника энзимных исследований имеет важное значение для интерпретации полученных результатов. Измеряемая энзимная активность в сыворотке является результатом влияния различных факторов. Многообразие методов определения энзимной активности, даже — само изменение в субстратной концентрации при одном и том же методе, обусловливают значительные различия полученных результатов. Вопреки предложению Международного союза биохимиков (JUB) об употреблении стандартной международной единицы все еще используются самые различные единицы. Их можно перевести в международные с помощью коэффициента пересчета. Неудовлетворительному состоянию этой проблемы способствовало и быстрое изменение первоначального определения энзимной активности. За 1 ME принимают количество энзима, который при стандартных условиях вызывает превращение 1 мк/моль субстрата за 1 мин при 25°С (определение 1961 г.). Впоследствии температура была изменена на 30°С (1964). рН и субстратная концентрация должны быть оптимальными. Энзимная концентрация обозначается в МЕ/л раствора или МЕ/мл раствора, МЕ/кг или МЕ/г ткани. Специфичная активность обозначается в МЕ/мг энзимного препарата, а молекулярная активность — в МЕ/мк/моль энзима. По вопросу о международной единице энзимной активности (Па) следует отметить предложения IUPAC-IFCC (1966). В них учитываются как положительные стороны, так и недостатки предыдущих решений и впервые вводится в качестве основной единицы катал. Неудачные предложения ШРАС-ШВ (1972) были отвергнуты Комиссией по мерам и единицам в клинической химии при Секции клинической химии IUPAC и Экспертным советом по мерам и единицам при Комитете стандартов IFCC. Вряд ли и это решение будет последним, но в настоящее время основная единица катал (kat) дефинируется как каталитическое количество любого катализатора (включая энзим), катализирующее скорость реакции 1 мол/с в исследуемой системе.

Исследование энзимов в пунктатах плевральной, асцитной и синовиальной жидкости имеет известное значение для выяснения этиологии выпотевания. Обыкновенно исследуют ЛДГ и ее изоэнзимы, АЛД и др. По всей вероятности, найденные энзимы происходят не из плазмы, а из соседних тканей и органов (плевра, синовиальная оболочка) и из перешедших в пунктат лейкоцитов. В некоторых случаях активность энзимов определяется, кроме сыворотки, непосредственно и в ткани соответствующего органа. Исследования множества более часто употребляемых в энзимной диагностике энзимов позволили идентифицировать энзимные типы (энзимные спектры) органов. Они существенно отличаются от измеренной активности в сыворотке не только здоровых людей, но и при заболевании органа вследствие деформации энзимного типа. Высокая активность энзимов в клетках позволяет при исследовании энзимного типа органов использовать малые куски ткани (10-15 мг), полученные путем пункционной биопсии. Особенно подробно изучен энзимный тип печени, разработаны точные методы и техника исследования. Работы Schmidt и соавт., Schmidt и Schmidt и Мансуровой, выполненные путем одновременного определения активности энзимов в выворотке и в гомо-генате печени, пролили свет на патогенез энзимных изменений при печеночных заболеваниях. Соотношения между энзимной активностью в печени и сыворотке достаточно сложны и для отдельных энзимов часто противоположны. Классическая теория о механизме гиперэнзимемии в сыворотке — снижение энзимной активности в печени и переход энзима в сыворотку — не может объяснить наблюдаемые изменения для некоторых энзимов. АФ и глюкозо-6-фос-фатдегидрогеназа, как и ГГТП, увеличивают свою активность в печени и в сыворотке, холинэстераза уменьшается в печени и сыворотке, а трансаминазы уменьшаются в печени и повышаются в сыворотке. Исследование энзимного типа печени имеет преимущественно теоретическое значение, а для целей практической лабораторной диагностики заболеваний достаточно определения энзимов в сыворотке. Благодаря легкой доступности клеток крови и особенно эритроцитов они используются сравнительно часто при диагностике их метаболических заболеваний, как и некоторых врожденных энзимопатий.